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助推基因治i疗- sciex毛细管电泳多重表征综合应用方案:
通过在 dna和 mrna水平上对致病基因进行修正从而达到i效果,与传统药相比,对于一些不具药i效的靶点具有的优势,因此基因治i疗对特定基因引起的疾i病有很大的应用潜力,其中肿i瘤和罕见病是基因治i疗至主要的应用领域。基因治i疗药 gendicine在中国于2004年被 fda批准上市,成为上第i一个商业化的基因治i疗产品,液相消耗品售后代理,这是上第i一个上市的基因治i疗产品。溶瘤---产品 oncorine也于2005年在中国获批上市,目前已有300多种基因治i疗产品已经上市,或正在 fda和 ema的---下进行研发,液相消耗品南区总代理,这些基因治i疗产品都涉及持续的编码蛋白质 dna转移,利用多种体内外技术。
sciexp800 plus药分析系统可广泛用于质粒 dna纯度分析、腺相关---(aav)、腺相关---(aav)衣壳蛋白的纯度分析、腺相关---的等电点分析、宿主细胞残留 dna的片段分布分析等多个方向
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高i效液相色谱高压泵的重要性和用户对高压泵的具体要求如下:
(1)流量可连续调节,流量范围宽
当前国际上 高i效液相色谱使用的高压泵,大部分流量可达到0.001-10.0 ml/min (制备色谱的流量较大,有时需要达到数千 ml/min),可同时满足各种不同内径色谱柱的分析工作需求。
(2)---的流动重复性。
大量 高i效液相色谱可使泵的流量重复性达到0.07%(rsd)。但重复性与检测方法有关,国际上一般采用两种方法来检测:一种是重量法,将泵单位时间内流出液,在天平上直接称重,判断重复性;另一种是保留时间法,根据保存时间的长短判断流量的重复性。对 高i效液相色谱进行分析时,揭阳液相消耗品,通常以保留时间作为定性分析。高电压泵的重复性(rsd)是一个---重要的指标,也是影响整个系统重复性的一个非常重要的性能技术指标。
(3)体积小。
高电压泵死量会影响 高i效液相色谱的分析精密度和准确度,尤其是对梯度洗脱的影响,通常都希望死体积越小越好。由于高压泵体积小,有利于快速置换溶剂,并有利于及时排出系统中的气泡。
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在高i效液相色谱分析中,常采用和配制流动相。常用的高i效液相色谱法试剂至好是试剂,如色谱纯化试剂等。当要求不太严格时,纯级甚至是分析纯的试剂都可以使用。紫外检测器是常用的高i效液相色谱分析方法,因此,应从降低基线噪声和提高分析灵敏度的角度考虑,采用紫外吸收小、杂质少的纯紫外吸收剂。
1.过滤流动相。在使用前,准备好的流动相要用0.5 um口径的微孔滤膜进行过滤。因为溶液中含有许多用肉眼很难发现的微粒,如果不滤除它们,泵口、柱头上的过滤器就会堵塞,从而阻塞了流动相的正常通道,使色谱柱的阻力增大,柱效降低。遇到此情况时,换用过滤过的流动相,拆开堵塞过的过滤器,浸在20%的水溶液中,用超声波清洗机清洗20分钟,以除去滤片上的堵塞。
2、流动相的脱气。在使用之前,必须先除气,以便尽可能地去除溶解在流动相中的气体,液相消耗品批发,否则,这些气体会使柱填料的性能下降,并对检测器的信号产生较大的干扰。目前,各种脱气方法有超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。目前应用至多的是真空脱气法和氮气流法。在无气状态下,水与混合时会产生大量的气泡,气泡会进入色谱柱和检测器中,影响分析工作的正常进行。
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